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| 卵巢癌細胞;Caov-4 |
生長特性 | 貼壁生長 |
貨號 | EY-X63850 |
細胞名稱 卵巢癌細胞;Caov-4
形態(tài)特性: 上皮細胞樣
生長特性: 貼壁生長
特征特性: 該細胞源自一位45歲卵巢腺癌女性患者的漿膜下的輸卵管。
培養(yǎng)條件: L15:LeibovitzMedium20%FBS
傳代方法: 1:2~1:3傳代,每周換液2~3次
傳代情況: P39
凍存條件: 基礎培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測: 培養(yǎng)法(-)
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產品特點:
1、 使用方便:不需昂貴設備。
2、 可以處理各種細菌菌體,包括新鮮菌液和冰凍菌體。
3、 將蛋白提取的時間縮短至30分鐘-1小時。
4、 采用溫和的中性裂解組分,保持蛋白活性。
5、 含蛋白穩(wěn)定劑,提取的蛋白穩(wěn)定。
6、 紫外檢測蛋白濃度時,背景干擾低。
7、 蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解,蛋白酶抑制劑配方優(yōu)化。蛋白酶抑制劑混合物包含6種獨立的蛋白酶抑制劑;每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優(yōu)化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性,包括蛋白酶、半酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶等。
8、 本試劑盒中不有EDTA,與金屬螯和層析等兼容。
培養(yǎng)操作步驟 :
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質玻璃,并經過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
操作流程:
1.1主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細胞的復蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細胞的復蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預熱,8~10倍體積)離心管內,稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內,在37℃、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細胞48h換液1次,細胞長至60%~70%融合時,用0.25%消化1~2min,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散,為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細胞懸液,然后加入倍量的培養(yǎng)基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細胞的計數 常規(guī)消化細胞,待細胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數板蓋玻片的一側加微量細胞懸液,用10×物鏡觀察計數板四角大方格細胞數,按公式計算出細胞數。細胞數/ml原液=(四方格細胞數之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數生的細胞,以0.25%消化成單細胞懸液,計數后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中,每兩小時隨機取出3瓶細胞,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞,加入胰消化酶消化、計數已貼壁細胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細胞數/接種細胞數) ,計算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數生的細胞用消化制成單細胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔,計數每孔細胞的數目并計算平均值。
α-內啡肽檢測試劑盒細胞名稱: 人膀胱癌細胞;J82形態(tài)特性: 上皮細胞樣Alpha-Endorphin
生長調節(jié)致癌基因β檢測試劑盒細胞名稱: 人伯基特淋巴瘤細胞;EB-3形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣Growth-Regulated protein β
凝集蛋白家族10檢測試劑盒細胞名稱: 人細胞;H1HeLa形態(tài)特性: 上皮細胞樣Colletin-10
泛素羧基末端水解酶42檢測試劑盒細胞名稱: 人急性T淋巴細胞白血病細胞;Jurkat形態(tài)特性: 圓形,單個或呈片ubiquitin C-terminal hydrolase 42
補體成分C1q受體檢測試劑盒細胞名稱: 人導管癌細胞;MDA-MB-175Ⅶ形態(tài)特性: 上皮細胞樣Complement 1q receptor
癲癇發(fā)作6樣蛋白檢測試劑盒細胞名稱: 人癌細胞;MDA-MB-415形態(tài)特性: 上皮細胞樣Seizure 6-like protein
卵泡抑素相關蛋白檢測試劑盒細胞名稱: 人急性T淋巴細胞白血病細胞;JurkatE6-1形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣Follistatin Like Protein 1
S100鈣結合蛋白A12;鈣粒蛋白C檢測試劑盒細胞名稱: 人導管癌細胞;MDA-MB-435形態(tài)特性: 上皮細胞樣S100A12
蛋白酶體亞基β5型檢測試劑盒細胞名稱: 人癌細胞;MDA-MB-436形態(tài)特性: 多角形Proteasome Subunit Beta Type 5
C4b結合蛋白α鏈檢測試劑盒細胞名稱: 人肺鱗癌細胞;NCI-H1703形態(tài)特性: 上皮細胞樣C4 Binding Protein Alpha
肌動蛋白相關蛋白2;3復合亞單位3檢測試劑盒細胞名稱: 人大細胞肺癌細胞;NCI-H460形態(tài)特性: 上皮細胞樣Actin-related protein 2/3 complex subunit 3
過氧氧化還原酶2檢測試劑盒細胞名稱: 人肺鱗癌細胞;NCI-H2170形態(tài)特性: 上皮細胞樣peroxiredoxin 2
半乳糖激酶1檢測試劑盒細胞名稱: 人大細胞肺癌細胞;NCI-H661形態(tài)特性: 上皮細胞樣galactokinase1
潛伏轉化生長因子結合蛋白1檢測試劑盒細胞名稱: 人小細胞肺癌細胞;NCI-H69形態(tài)特性: 聚團懸浮Latent-transforming growth factor beta-binding protein 1
受體檢測試劑盒細胞名稱: 人漿細胞白血病細胞;NCI-H929形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣Cortisol receptor
β2糖蛋白1抗體檢測試劑盒細胞名稱: 人結直腸腺癌細胞;NCI-H716形態(tài)特性: 上皮細胞樣β2-Glycoprotein 1 antibody
肉脂?;D移酶檢測試劑盒細胞名稱: 人卵巢上皮細胞癌細胞;OV-1063形態(tài)特性: 上皮細胞樣Carnitine palmityl transferase
卵巢癌細胞;Caov-45,7-二羥基色原31721-94-5英文名:5,7-dihydroxychromone
英文別名:5,7-Dihydroxychromen-4-one
CAS登錄號:31721-94-5
分子式:C9H6O4
分子量:178.14
分子結構:
外觀:黃色結晶
規(guī)格:20 mg/支
純度:≥ 98%
用途:用于含量測定/鑒定/藥理實驗等。
提取來源:落花生(Arachis hypogaea L.)的花生殼
溶解性:可溶于、DMSO等溶劑,不溶于。
熔點:266-268℃
藥理藥效:降血脂,抗氧化。
貯存條件: 4℃冷藏、密封、避光
有效期: 2年