產品及特點:
熒光定量PCR是在PCR體系中加入熒光化合物(熒光染料或熒光探針)。利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,使每個循環(huán)變得“可見”。本產品就是以探針法熒光定量 RT-PCR 技術為基礎開發(fā)的專門檢測探針法熒光定量PCR試劑盒的試劑盒。
產品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
四輻射鳥圓線蟲探針法PCR熒光定量試劑盒 | Ornithostrongylus quadriradiatus | EY00P9196 |
運輸及保存: 低溫運輸,-20℃保存,保存期限為12個月。
自備試劑:樣品 RNA。
分類:熒光定量PCR試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費。
客戶只需提供樣品和待檢測基因名稱即可。由我們提取RNA,設計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實驗報告給您。
染料法
探針法
可進行相對,定量表達分析,定性分析,SNP檢測等
實驗報告
電泳圖 ·標準曲線
溶解曲線 ·擴增曲線
完整的實驗過程、試劑、儀器及分析報告
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使用方法
一、稀釋標準曲線樣品(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產品不提供活體樣品做陽性對照,只提供無傳染性的 DNA 段作為陽性對照。
1. 標記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 RT-PCR 模板稀釋液,用帶芯槍頭,下同)。
3. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照(試劑盒提供),充分震蕩1分鐘,得 1×10E7 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的標準曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 RNA 的制備
7. 如果有N個樣品,設置N+2個提取,多出的一個是PC(樣品制備陽性對照),一個是 NC(樣品制備陰性對照)??梢杂?0μL陽性對照的10000倍稀釋液再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。
8. 用自選方法純化樣品的RNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒RNA提取試劑盒兼容。也以選購本公司的柱式病毒RNAout。本試劑盒免費贈送20次免RNA提取的核酸釋放劑試用裝,該釋放劑的裂解液可以直接作為RT-PCR模板,省略了RNA提取步驟。
三、Probe qRT-PCR 反應(20μL 體系,在樣品制備室進行)
9. 如果做定量分析并且只做1次重復,則標記N+9個PCR 管,其中N+2個用于上步得到的 N+2個樣品,1個用于PCR陰性對照(用水做模板),6個用于標準曲線。如果做定性分析,并且只做1次重復,則標記N+4 個PCR管,其中N+2個用于上步得到的N+2個樣品,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),1個用于PCR陽性對照(用第4號管的陽性對照稀釋液做模板)。下面只以定量分析為例描述操作步驟。
10. 在標記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復。樣品管和陰性對照設置完畢后才設置陽性對照,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后加)
alpha-熊果苷(標準品)羅漢果苷III(標準品)Human LGP2 ELISA Kit
alpha-熊果苷羅漢果苷IV(標準品)Human LGI3 ELISA Kit
alpha-熊果苷羅漢果黃素Human LGR5 ELISA Kit
alpha-熊果苷羅漢果皂苷IvaHuman LDLRAD1 ELISA Kit
西多福韋二水合物羅漢果皂苷Ive(標準品)Human LDOC1 ELISA Kit
西多福韋二水合物羅漢果皂苷V(標準品)Human LEF1 ELISA Kit
NVP-AUY922羅漢果皂苷ⅡA2Human LGR6 ELISA Kit
NVP-AUY922羅漢果皂苷ⅢA1Human LCOR ELISA Kit
NVP-AUY922羅漢果皂苷ⅢeHuman LCORL ELISA Kit
羅漢松樹脂酚-4'-O-β-龍膽二糖苷(標準品)Human LCTL ELISA Kit
/左旋延胡索乙素/左旋四氫巴馬汀(標準品)Human LDB3 ELISA Kit
蘿卜硫素;萊菔硫烷(標準品)Human LDHAL6A ELISA Kit
AZD8055裸花紫珠(標準品)Human LDB1 ELISA Kit
AZD8055絡塞定(標準品)Human LDLRAD1 ELISA Kit
AZD8055絡塞琳(標準品)Human LDOC1 ELISA Kit
四輻射鳥圓線蟲探針法PCR熒光定量試劑盒成纖維細胞生長因子13(FGF13)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)化啶(>95% (HPLC),BC) 質量規(guī)格:>98%,標準品
亮氨酰氨基肽酶(LAP)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)十二烷基苯磺酸鈉(>95%,Tech Grade) 質量規(guī)格:>98%,標準品
脂肪細胞型脂肪酸結合蛋白(FABP4)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)十二烷基苯磺酸鈉(>95%,Tech Grade) 質量規(guī)格:>97%,標準品
谷氨酰酶(GLS)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)硅酸鈉九水(>98%,BR) 質量規(guī)格:>95%,BR
谷氨酰酶2(GLS2)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)多聚磷酸鈉(>98%,BR) 質量規(guī)格:分析標準品
肌加氧酶(MIOX)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)鹽酸三(>98%,BR) 質量規(guī)格:potency>877U per mg
核纖層蛋白A/C(LMNA)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)5-溴-3-吲哚基-β-D-吡喃半乳糖苷(>98%,BR) 質量規(guī)格:>98%
氨乙酰酸δ合酶1(ALAS1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)二水 質量規(guī)格:≥98.5%(GC),分析標準品