綜合微生物的培養(yǎng)方法,包括以下步驟:
(1)前期準備:(A)滅菌處理;(B)制備Biolite水;(C)檢查設備和材料;
(2)按比例配制培養(yǎng)材料;
(3)導入曝氣,進行繁殖培養(yǎng);
(4)取液觀察;(a)取液;(b)稀釋菌液;(c)平板培養(yǎng);
(5)分離并檢測;
(6)取液儲存;通過該綜合微生物培養(yǎng)方法簡單可操作性強,培養(yǎng)的綜合微生物均在3代以內,菌類穩(wěn)定不發(fā)生突變,且繁殖快速。
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規(guī)格參數(shù):
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
枯草芽胞桿菌枯草亞種品牌 | Bacillus s | EY-J963357 |
資源名稱: 枯草芽胞桿菌枯草亞種
種屬: Bacillus subtilis subsp. subtilis
提供形式: 凍干物
安全等級: 1
模式菌株: no
應用領域: 用于提取聚。
培養(yǎng)基: LB,哥倫比亞血平板,好氧
生長條件: 30℃
存儲條件: 真空冷凍干燥法
低溫存法:
①簡單保存法,將瓊脂斜面孢子培養(yǎng)物、菌絲懸浮液以及由麩皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培養(yǎng)物置于4℃冰箱保存,保存時間不超過1~2個月,若將谷物原料制備的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蠟,以隔絕外界空氣和水汽,保持時間可達3~4個月;②液氮超低溫保存法,將生長穩(wěn)定期的細胞懸浮在10%甘油或其他低冰點液體中,密封于安瓿管內,然后控制冷卻速度,使安瓿管溫度逐步下降至 -35℃時,即可置于-150~-196℃的液氮罐中保存。大多數(shù)微生物如病毒、噬菌體、多種細菌、放線菌、酵母和原蟲、特別是一些用冷凍干燥法有困難的微生物,都可用此法保存。
微生物菌種的培養(yǎng):
⒈ 孢子制備
⑴ 放線菌孢子的制備
一般采用瓊脂斜面培養(yǎng)基,培養(yǎng)基中含有一些適合產(chǎn)孢子的營養(yǎng)成分,如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無機鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1%,氮源不超過0.5%),碳源豐富容易造成酸性的營養(yǎng)環(huán)境,不利于放線菌孢子的形成,氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下,干燥和限制營養(yǎng)可直接或間接誘導孢子形成。放線菌斜面的培養(yǎng)溫度大多數(shù)為28 ℃,少數(shù)為37 ℃,培養(yǎng)時間為5~14天。
⑵ 霉菌孢子的制備
霉菌的孢子培養(yǎng),一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農(nóng)產(chǎn)品為培養(yǎng)基。這是由于這些農(nóng)產(chǎn)品中的營養(yǎng)成分較適合霉菌的孢子繁殖,而且這類培養(yǎng)基的表面積較大,可獲得大量的孢子。霉菌的培養(yǎng)一般為25~28 ℃,培養(yǎng)時間為4~14天。
⒉ 種子制備
⑴ 搖瓶種子制備
搖瓶種子進罐,常采用母瓶、子瓶兩級培養(yǎng),有時母瓶種子也可以直接進罐。種子培養(yǎng)基要求比較豐富和*,并易被菌體分解利用,氮源豐富有利于菌絲生長。原則上各種營養(yǎng)成分不宜過濃,子瓶培養(yǎng)基濃度比母瓶略高,更接近種子罐的培養(yǎng)基配方。
⑵ 種子罐種子制備
種子罐種子制備的工藝過程,因菌種不同而異,一般可分為一級種子、二級種子和三級種子的制備。孢子(或搖瓶菌絲)被接入到體積較小的種子罐中,經(jīng)培養(yǎng)后形成大量的菌絲,這樣的種子稱為一級種子,把一級種子轉入發(fā)酵罐內發(fā)酵,稱為二級發(fā)酵。如果將一級種子接入體積較大的種子罐內,經(jīng)過培養(yǎng)形成更多的菌絲,這樣制備的種子稱為二級種子,將二級種子轉入發(fā)酵罐內發(fā)酵,稱為三級發(fā)酵。同樣道理,使用三級種子的發(fā)酵,稱為四級發(fā)酵。
ChaetormiumbrasillenseBatistaetPontual 中文名稱:巴西毛殼ChaetormiumbrasillenseBatistaetPontual安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:14,17生長條件:25-28℃ 純度:97%
CephalosporiumacremoniumCorda 中文名稱:頂頭孢霉CephalosporiumacremoniumCorda安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:14,17生長條件:25-28℃ 純度:1.0 M in THF
Botrytis│cinerea Pers. 中文名稱:灰葡萄孢Botrytis│cinerea Pers.分離基物:葡萄提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no應用領域:進行分析檢測及抗病性鑒定,指導。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:66生長條件:20存儲條件:定期移植法 純度:1.0 M in THF
Aspergillus wentii Wehmer 中文名稱:溫特曲霉Aspergillus wentii Wehmer安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:Czapek's 瓊脂:蔗糖 30.0 g,NaNO3 3.0 g,MgSO4·7H2O 0.5 g,KCl 0.5 g,FeSO4·4H2O 0.01 g,K2HPO4 1.0 g,瓊脂 15.0 g,蒸餾 1.0 L,pH 6.0-6.5,121℃,15min。121℃,15min。生長條件:25-28℃,好氧 純度:97%
AspergillusrricolaMarchal 中文名稱:棲土曲霉AspergillusrricolaMarchal安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:15,17生長條件:25-28℃ 純度:≥99.0%(GC)
Aspergillus│sojae 中文名稱:醬油曲霉Aspergillus│sojae提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0077生長條件:28-30℃存儲條件:真空冷凍干燥法 純度:≥99.0%(GC)
Aspergillus parasiticus Speare 中文名稱:寄生曲霉Aspergillus parasiticus Speare提供形式:凍干安全等級:1模式菌株:no應用領域:產(chǎn)素培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:綜合PDA:20%馬鈴薯汁1L,葡萄糖20g ,KH2PO4 3g, MgSO4.7H2O 1.5g,硫胺素微量,瓊脂 15g,pH 自然。生長條件:25-28℃,好氧 純度:≥99%
Streptomycesthermophila 中文名稱:嗜熱鏈霉菌Streptomycesthermophila安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:12生長條件:28℃ 純度:≥99%
枯草芽胞桿菌枯草亞種品牌Acetyl CoA Carboxylase 乙酰羧化酶抗體肉桂N-Fmoc-N'-Boc-L-2,3-二氨基TRBF1 (omeric repeat binding factor 1) 端粒體復制結合因子1抗原
Phospho-Acetyl CoA Carboxylase(Ser79) 磷化乙酰羧化酶抗體果糖N-Fmoc-N'-Boc-L-2,3-二氨基TRIM32(tripartite motif protein 32) TRIM32抗原
ACD 腎上腺皮質發(fā)育異常蛋白抗體芒果苷脂化物Trop-2/Tpm2 peptide 原肌球蛋白抗原
AchE 乙酰膽酶抗體新芒果苷1-金剛烷乙睛TSARG4(Testis and spermatogenesis related gene 4) 生精細胞凋亡相關基因4抗原
Acinus Acinus抗體DL-薄荷2,4-二苯磺酰TSGF(Tumor Specific Growth Fanctor) 惡性腫瘤特異性生長因子抗原
phospho-Acinus(Ser1180) 磷化腺泡Acinus蛋白抗體酪2,4-二苯磺酰CIDEB peptide CIDEB抗原
Ack1 醋激酶1抗體(R型)人參皂苷Rh14-溴-2,6-二苯甲Tsg101(Tumor susceptibility gene 101 protein) Tsg101抗原
Phospho-Ack1(Tyr857/858) 磷化Ack1抗體濱蒿內酯4-溴-2,6-二苯甲TSHR (Thyroid stimulating hormone receptor) 促甲狀腺素受體抗原