綜合微生物的培養(yǎng)方法,包括以下步驟:
(1)前期準(zhǔn)備:(A)滅菌處理;(B)制備Biolite水;(C)檢查設(shè)備和材料;
(2)按比例配制培養(yǎng)材料;
(3)導(dǎo)入曝氣,進(jìn)行繁殖培養(yǎng);
(4)取液觀察;(a)取液;(b)稀釋菌液;(c)平板培養(yǎng);
(5)分離并檢測(cè);
(6)取液儲(chǔ)存;通過(guò)該綜合微生物培養(yǎng)方法簡(jiǎn)單可操作性強(qiáng),培養(yǎng)的綜合微生物均在3代以?xún)?nèi),菌類(lèi)穩(wěn)定不發(fā)生突變,且繁殖快速。
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規(guī)格參數(shù):
產(chǎn)品名稱(chēng) | 英文名稱(chēng) | 貨號(hào) |
魯氏酵母說(shuō)明書(shū) | Saccharomy | EY-J963900 |
資源名稱(chēng): 魯氏酵母
種屬: Saccharomyces rouxii Boutroux
提供形式: 凍干粉
安全等級(jí): 1
模式菌株: no
應(yīng)用領(lǐng)域: 甜醬酵母
培養(yǎng)基: YM:酵母提取物 3.0 g,麥芽提取物 3.0 g, 葡萄糖 10.0 g, 蛋白棟 5.0 g, 瓊脂 20.0 g, 蒸餾水 1000 ml, pH 6.2 +/- 0.2。121℃,15min。
生長(zhǎng)條件: 25-28℃,好氧
低溫存法:
①簡(jiǎn)單保存法,將瓊脂斜面孢子培養(yǎng)物、菌絲懸浮液以及由麩皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培養(yǎng)物置于4℃冰箱保存,保存時(shí)間不超過(guò)1~2個(gè)月,若將谷物原料制備的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蠟,以隔絕外界空氣和水汽,保持時(shí)間可達(dá)3~4個(gè)月;②液氮超低溫保存法,將生長(zhǎng)穩(wěn)定期的細(xì)胞懸浮在10%甘油或其他低冰點(diǎn)液體中,密封于安瓿管內(nèi),然后控制冷卻速度,使安瓿管溫度逐步下降至 -35℃時(shí),即可置于-150~-196℃的液氮罐中保存。大多數(shù)微生物如病毒、噬菌體、多種細(xì)菌、放線菌、酵母和原蟲(chóng)、特別是一些用冷凍干燥法有困難的微生物,都可用此法保存。
微生物菌種的培養(yǎng):
⒈ 孢子制備
⑴ 放線菌孢子的制備
一般采用瓊脂斜面培養(yǎng)基,培養(yǎng)基中含有一些適合產(chǎn)孢子的營(yíng)養(yǎng)成分,如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無(wú)機(jī)鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1%,氮源不超過(guò)0.5%),碳源豐富容易造成酸性的營(yíng)養(yǎng)環(huán)境,不利于放線菌孢子的形成,氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下,干燥和限制營(yíng)養(yǎng)可直接或間接誘導(dǎo)孢子形成。放線菌斜面的培養(yǎng)溫度大多數(shù)為28 ℃,少數(shù)為37 ℃,培養(yǎng)時(shí)間為5~14天。
⑵ 霉菌孢子的制備
霉菌的孢子培養(yǎng),一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農(nóng)產(chǎn)品為培養(yǎng)基。這是由于這些農(nóng)產(chǎn)品中的營(yíng)養(yǎng)成分較適合霉菌的孢子繁殖,而且這類(lèi)培養(yǎng)基的表面積較大,可獲得大量的孢子。霉菌的培養(yǎng)一般為25~28 ℃,培養(yǎng)時(shí)間為4~14天。
⒉ 種子制備
⑴ 搖瓶種子制備
搖瓶種子進(jìn)罐,常采用母瓶、子瓶?jī)杉?jí)培養(yǎng),有時(shí)母瓶種子也可以直接進(jìn)罐。種子培養(yǎng)基要求比較豐富和*,并易被菌體分解利用,氮源豐富有利于菌絲生長(zhǎng)。原則上各種營(yíng)養(yǎng)成分不宜過(guò)濃,子瓶培養(yǎng)基濃度比母瓶略高,更接近種子罐的培養(yǎng)基配方。
⑵ 種子罐種子制備
種子罐種子制備的工藝過(guò)程,因菌種不同而異,一般可分為一級(jí)種子、二級(jí)種子和三級(jí)種子的制備。孢子(或搖瓶菌絲)被接入到體積較小的種子罐中,經(jīng)培養(yǎng)后形成大量的菌絲,這樣的種子稱(chēng)為一級(jí)種子,把一級(jí)種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵,稱(chēng)為二級(jí)發(fā)酵。如果將一級(jí)種子接入體積較大的種子罐內(nèi),經(jīng)過(guò)培養(yǎng)形成更多的菌絲,這樣制備的種子稱(chēng)為二級(jí)種子,將二級(jí)種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵,稱(chēng)為三級(jí)發(fā)酵。同樣道理,使用三級(jí)種子的發(fā)酵,稱(chēng)為四級(jí)發(fā)酵。
甘肽(GAL)(學(xué)發(fā)光免疫分析法)Astragaloside Ⅱ純度:≥98%
甘肽(GAL)(學(xué)發(fā)光免疫分析法)Astragaloside Ⅲ純度:≥98%
甘肽(GAL)(學(xué)發(fā)光免疫分析法)Pimpinellin純度:≥98%
甘油醛3脫氫酶(GAPDH)(學(xué)發(fā)光免疫分析法)Nepetin7glucoside純度:>96%
肝癌衍生生長(zhǎng)因子樣蛋白1(HDGFL1)(學(xué)發(fā)光免疫分析法)Geniposide純度:≥98%
肝癌衍生生長(zhǎng)因子樣蛋白1(HDGFL1)(學(xué)發(fā)光免疫分析法)Secoisolariciresinol純度:≥98%
肝癌衍生生長(zhǎng)因子樣蛋白1(HDGFL1)(學(xué)發(fā)光免疫分析法)Geraniin純度:97%
FGF5 纖維母細(xì)胞生長(zhǎng)因子5抗體 * 0.1ml Eriodictyol
FGF6 纖維母細(xì)胞生長(zhǎng)因子6抗體 * 0.1ml Dendrobine
KCNK TWIK相關(guān)敏感離子通道蛋白9抗體 * 0.2ml Punicalin
KDM4C/GASC1/JMJD2C 鱗狀細(xì)胞癌增強(qiáng)蛋白1抗體 * 0.1ml (−)Huperzine A
KGF/FGF7 纖維母細(xì)胞生長(zhǎng)因子7抗體 * 0.1ml Cyanidin3Oglucoside chloride
FGF8/HBGF8 成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子8抗體 * 0.1ml Carthamine;Safflower Yellow
KLHL7 kelch樣蛋白7抗體 * 0.2ml L(+)Rhamnose monohydrate
FGF10 成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子10抗體 * 0.1ml L(+)Rhamnose monohydrate
胰淀酶α2A(AMY2A)酶聯(lián)免疫試劑盒 ,英文名: AMY2A ELISA Kit
抗浦肯野細(xì)胞抗體/抗Yo抗體(PCA-1/Yo)ELISA檢測(cè)試劑盒Humanpurkinjecellaoaibody,PCA-1/YoELISAKit 96T/48T
β位淀樣前體蛋白裂解酶1(BACE1)酶聯(lián)免疫試劑盒 Rat β-site APP-Cleaving Enzyme 1,BACE1 ELISA Kit
CLIAKitfo.gondii(HumaoxoplasmaGondiiELISAKit剛地弓形蟲(chóng)規(guī)格:48T/96T
體Stat1基因基化檢測(cè)試劑盒20次
ELISAKitMSA抗紡錘體抗體規(guī)格:48T/96T
N鈣黏蛋白/神經(jīng)鈣黏蛋白(N-Cad)酶聯(lián)免疫試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
兔載脂蛋白B100(apo-B100)酶聯(lián)免疫試劑盒 Rabbit apolipoprotein B100,Apo-B100 ELISA Kit
驅(qū)動(dòng)蛋白家族成員27(KIF27)酶聯(lián)免疫試劑盒 ,英文名: KIF27 ELISA Kit
RabbitCompleme3,C3酶聯(lián)免疫試劑盒兔補(bǔ)體蛋白3(C3)酶聯(lián)免疫試劑盒規(guī)格:96T/48T
Humanai-immunodeficiencyvirusaibody,HIV酶聯(lián)免疫試劑盒抗類(lèi)免疫缺陷病抗體(HIV)酶聯(lián)免疫試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanCandidaAlbicans,C.albicansELISAKit白色念珠菌(C.albicans)酶聯(lián)免疫試劑盒規(guī)格:96T/48T
魯氏酵母說(shuō)明書(shū)Gentamicin/FITC 熒光素標(biāo)記抗體IgG膜糖蛋白CD200抗體2-羥基-5-基吡Rat PTH (Parathyroid Hormone) ELISA Kit
GFAP/FITC 熒光素標(biāo)記膠質(zhì)纖維性蛋白抗體IgG胰羧肽酶A1抗體2-羥基-5-基吡Rat PTHR2 (Parathyroid Hormone Receptor 2) ELISA Kit
GFP/FITC 熒光素標(biāo)記綠色熒光蛋白抗體IgG羧肽酶A2抗體3,6-二溴-9-乙基咔唑Rat PTHRP (Parathyroid Hormone Related Protein) ELISA Kit
GFP/FITC 熒光素標(biāo)記綠色熒光蛋白抗體IgG腦源性免疫球蛋白超家族蛋白3抗體3,6-二溴-9-乙基咔唑Rat PDAP1 (Pdgfa Associated Protein 1) ELISA Kit
GFP/FITC (Green Fluorecent protein) 熒光素標(biāo)記兔抗綠色熒光蛋白抗體IgG胰羧肽酶B1抗體(3--2-羥基)基化銨 溶液Rat PTD (Pentosidine) ELISA Kit
human Fibrinogen/Biotin 化兔抗細(xì)胞維甲結(jié)合蛋白2抗體(3--2-羥基)基化銨 溶液Rat PP (Pepsin) ELISA Kit
GFR Alpha-1/GDNF /FITC 熒光素標(biāo)記GDNF家族受體α-1抗體IgG2號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框80抗體2,5-二甲氧基二Rat PYY (Peptide YY) ELISA Kit
GFRA4/FITC 熒光素標(biāo)記GDNF家族受體α-4抗體IgG磷化CD32B抗體2,5-二甲氧基二Rat PRF1 (Perforin 1) ELISA Kit